引物浓度,PCR引物浓度是如何设定的?
PCR引物浓度是如何设定的?
一般都稀释成应用液,常用浓度是10uM/L也就是10pM/L.这样的话,20ul体系加1ul,50ul体系加2ul,方便使用!至于引物会不会降解的问题,估计高浓度比低浓度保存时间长说法是对的。但是,通常引物在20度放半年都没有问题,如果不是经常用,可以先取出一部分来用,其余都放-80度保存,可以放很久。 引物稀释很简单,一般装引物的管子上都标有引物的量如3.6nM,你直接往管中加360ul的无菌双蒸水溶解就可以了 ,在加水之前要先高速离心管子几分钟,加水后要高速漩涡混匀几分钟就可以用了。
引物浓度对PCR的影响
引物的作用是帮助游离的碱基结合到DNA单链上去,在一定范围内,引物浓度越大DNA复制越快,超过一定浓度,达到饱和状态,对PCR影响减弱,此时DNA的复制速度与底物浓度成正相关.
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